凝血分析儀的前世今生

　　1910年，Kottman發(fā)明了世界上較早的血凝儀，通過(guò)測(cè)定血液凝固時(shí)粘度的變化來(lái)反映血漿凝固的時(shí)間。20世紀(jì)60年代，機(jī)械法血凝儀得到開(kāi)發(fā)，出現(xiàn)了早期的平面磁珠法。70年代以后，由于機(jī)械、電子工業(yè)的發(fā)展，使各種類型的全自動(dòng)血凝儀先后問(wèn)世。80年代，由于發(fā)色底物的出現(xiàn)并應(yīng)用于血液凝固的檢測(cè)，使全自動(dòng)血凝儀除了可以進(jìn)行一般的篩選試驗(yàn)外，尚可以進(jìn)行凝血、抗凝、纖維蛋白溶解系統(tǒng)單個(gè)因子的檢測(cè)，使抗凝、纖溶的檢測(cè)成為可能。90年代，全自動(dòng)血凝儀免疫通道的開(kāi)發(fā)將各種檢測(cè)方法融為一體，檢測(cè)的項(xiàng)目更加全面，為血栓與止血的檢測(cè)提供了新的手段，進(jìn)入了分子生物學(xué)時(shí)代。

　　凝血檢測(cè)的項(xiàng)目及主要檢測(cè)方法

　　凝血儀主要是用來(lái)對(duì)血液凝固檢測(cè)的一種儀器，主要的檢測(cè)項(xiàng)目為：凝血酶原時(shí)間(PT)、活化部分凝血活酶時(shí)間(APTT)、凝血酶時(shí)間(TT)、纖維蛋白原(FIB)、D-二聚體(D-Dimer)、纖維蛋白(原)降解產(chǎn)物(FDP)、抗凝血酶III(AT-III)

　　不同類型的凝血分析儀采用的原理不同，目前主要采用的檢測(cè)辦法有：凝固法、發(fā)色底物法、免疫學(xué)法等;開(kāi)始的血凝儀的檢測(cè)原理是基于凝固法的檢測(cè)，因?yàn)樵摍z測(cè)方法的電流法測(cè)量可靠性差，所以逐步被磁珠法和光學(xué)法所替代;而目前市面上主流的儀器一般是單獨(dú)的光學(xué)法或者單獨(dú)的磁珠法;這兩種方法學(xué)又有何差異呢?

　　光學(xué)法(比濁法)

　　又分為散射法和透射法，光學(xué)法凝血儀是根據(jù)凝固過(guò)程中濁度的變化來(lái)測(cè)定凝血功能。根據(jù)待驗(yàn)樣品在凝固過(guò)程中光的變化來(lái)確定檢測(cè)終點(diǎn)的。當(dāng)向樣品中加入凝血激活劑后，隨著樣品中纖維蛋白凝塊的形成過(guò)程，樣品的光強(qiáng)度逐步增加，儀器把這種光學(xué)變化描繪成凝固曲線，當(dāng)樣品完全凝固以后，光的強(qiáng)度不再變化。光學(xué)法凝血測(cè)試的優(yōu)點(diǎn)在于靈敏度高、儀器結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、易于自動(dòng)化;缺點(diǎn)是脂血、黃疸、溶血樣本測(cè)不準(zhǔn)，嚴(yán)重干擾測(cè)不出;從我們目前的認(rèn)知來(lái)看，隨著科學(xué)的進(jìn)步，光學(xué)異常、加樣氣泡已經(jīng)不會(huì)成為嚴(yán)重的干擾因素。

　　磁珠法

　　早期的磁珠法是在檢測(cè)杯中放入一粒磁珠，與杯外一根鐵磁金屬桿緊貼呈直線狀，標(biāo)本凝固后，由于纖維蛋白的形成，使磁珠移位而偏離金屬桿，儀器據(jù)此檢測(cè)出凝固終點(diǎn)，這類儀器也可稱為平面磁珠法。早期平面磁珠法能有效克服光學(xué)法中樣品本底干擾問(wèn)題，但存在靈敏度低等缺點(diǎn)?，F(xiàn)代磁珠法出現(xiàn)在20世紀(jì)80年代末，90年代初進(jìn)入商品化?，F(xiàn)代磁珠法被稱為雙磁路磁珠法。測(cè)試原理如下：測(cè)試杯的兩側(cè)有一組驅(qū)動(dòng)線圈，它們產(chǎn)生恒定的交變電磁場(chǎng)，使測(cè)試杯內(nèi)特制的去磁小鋼珠保持等幅振蕩運(yùn)動(dòng)。凝血激活劑加入后，隨著纖維蛋白的產(chǎn)生增多，血漿的粘稠度增加，小鋼珠的運(yùn)動(dòng)振幅逐漸減弱，儀器根據(jù)另一組測(cè)量線圈感應(yīng)到小鋼珠運(yùn)動(dòng)的變化，當(dāng)運(yùn)動(dòng)幅度衰減到50%時(shí)確定凝固終點(diǎn)。雙磁路磁珠法的長(zhǎng)處在于不受特異血漿的攪擾，在結(jié)構(gòu)上，其檢測(cè)原理完全不受溶血、黃疸及高血脂癥的影響，甚至加樣中產(chǎn)生氣泡也不會(huì)影響測(cè)試結(jié)果的優(yōu)點(diǎn)。缺陷是儀器、試劑成本偏高。